简述利用杂交瘤技术进行单克隆抗体大规模生产的技术步骤与要点。

题目

简述利用杂交瘤技术进行单克隆抗体大规模生产的技术步骤与要点。

参考答案和解析
正确答案: 1.亲本细胞的准备(致敏B淋巴细胞、骨髓瘤细胞的准备)
2.细胞融合形成杂交瘤细胞
3.杂交瘤细胞的筛选(采用HAT(含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤A.和胸腺嘧啶核苷(T))选择性培养基)
4.可分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞的筛选:对每个含有杂交瘤细胞集落的生长孔中的上清液进行抗体检测,筛选出能够稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交细胞。检测方法:放射免疫测定、酶联免疫技术测定等
5.杂交瘤细胞的克隆化培养:有限稀释法或软琼脂平板法66、最常用的杂交瘤细胞杂交瘤细胞克隆方法有那些?(有限稀释法或软琼脂平板法)
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